游離膽固醇(FC)含量測(cè)定試劑盒 微量法
測(cè)定意義:FC是構(gòu)成細(xì)胞膜的主要成分,也是合成腎上腺皮質(zhì)激素、性激素、膽汁酸及維生素D等生理活性物質(zhì)的重要原料。FC濃度可作為脂代謝的指標(biāo)。
測(cè)定原理: FC氧化酶催化FC生成△4-膽甾烯酮和H2O2,過氧化物酶催化H2O2、4-氨基安替比林和酚生成紅色醌類化合物,在500nm有吸收峰,其顏色深淺與FC含量成正比。
自備儀器和用品:水浴鍋、可調(diào)式移液槍、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、和蒸餾水。
購買鏈接:BC1895 產(chǎn)品規(guī)格檢索 (labgogo.com)
游離膽固醇(FC)含量測(cè)定試劑盒 微量法
分光光度法
注意:正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
貨號(hào):BC1895
規(guī)格:100管/96樣
產(chǎn)品內(nèi)容:
試劑一:異丙醇50mL(自備);
工作液:液體50mL×1瓶,4℃保存;
標(biāo)準(zhǔn)品:液體1mL×1支,濃度為5μmol/mL,4℃保存。
產(chǎn)品說明: FC是構(gòu)成細(xì)胞膜的主要成分,也是合成腎上腺皮質(zhì)激素、性激素、膽汁酸及維生素D等生理活 性物質(zhì)的重要原料。FC濃度可作為脂代謝的指標(biāo)。
測(cè)定原理: FC氧化酶催化FC生成△4-膽甾烯 酮和H2O2,過氧化物酶催化H2O2、4-氨基安替比林和酚生成紅色醌類化合物,在500nm有吸收峰, 其顏色深淺與FC含量成正比。 自備儀器和用品: 水浴鍋、可調(diào)式移液槍、可見分光光度計(jì)、石英比色皿、異丙醇和蒸餾水。
操作步驟:
一、FC的提取:
1. 組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL 試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿。8000g,4℃離心10min,取上清置冰上待測(cè)。
2. 細(xì)菌、真菌:按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì) 胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲2秒,間隔3秒,總時(shí)間3min); 然后8000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測(cè)。
3. 血清(漿)樣品:直接測(cè)定。
二、測(cè)定操作:
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱 30min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到 500nm,蒸餾水調(diào)零。
2. FC 工作液在 40℃水浴中預(yù)熱 30min。
3. 標(biāo)準(zhǔn)管:依次在 1ml 玻璃比色皿中加入 20μLFC 標(biāo)準(zhǔn)液和 980μLFC 工作液,5min 后于 500nm 測(cè)定 A 標(biāo)準(zhǔn)管。 標(biāo)準(zhǔn)管只需做 1-2 個(gè)。
4. 測(cè)定管:依次在 1ml 玻璃比色皿中加入 20μLFC 測(cè)定液和 980μLFC 工作液,5min 后于 500nm 測(cè)定 A 標(biāo)準(zhǔn)管。
相關(guān)文獻(xiàn):
《Effects of extraction methods on the physicochemical characteristics and biological activities of polysaccharides from okra (Abelmoschus esculentus)》 作者:Qin Yuan,Shang Lin,Yuan Fu,Xi-Rui Nie,Wen Liu,Yan Su,Qiao-Hong Han,Li Zhao,Qing Zhang,De-Rong Lin,Wen Qin ,Ding-Tao Wu 期刊:International Journal of Biological Macromolecules 影響因子:4.784 PMID:30639655
《Characterization, in vitro binding properties, and inhibitory activity on pancreatic lipase of β-glucans from different Qingke (Tibetan hulless barley) c*rs》 作者:Huan Guo,Shang Lin,MinLua Jia Duo Bu Gong,Lu Wang,Qing Zhang,De-Rong Lin,Wen Qin,Ding-Tao Wu 期刊:International Journal of Biological Macromolecules 影響因子:4.784 PMID:30195000